
ZAVOD ZA
TRANSFUZIJSKU MEDICINU
FEDERACIJE BiH

Djelatnost i struktura
Zavod za transfuzijsku medicinu FBiH
Uprava
Odjeljenje za kolekciju krvi
Odjeljenje za imunohematološko testiranje
Odjeljenje za preparativnu transfuziologiju
Odsjek za detekciju koagulacionih poremećaja
Centar za tkivnu tipizaciju
Centar za edukaciju i naučno-istraživački rad
Odsjek za osiguranje i kontrolu kvaliteta
Ostali odsjeci
Centar za tkivnu tipizaciju
RADNO VRIJEME ZA UZIMANJE UZORAKA KRVI: svaki radni dan 7.30-10.00
RADNO VRIJEME ZA PODIZANJE NALAZA: svaki radni dan 13.30-14.30
TELEFON: 033/567-313
FAX: 033/270-170
Odgovorna osoba : Rukovodilac Elma Fejzić, magistar bioloških nauka.
SPISAK ANALIZA I METODE RADA:
- tipizacija antigena HLA sistema klase I
- tipizacija antigena HLA sistema klase II
- tipizacija HLA –B27 antigena
- panel reaktivnih antitijela HLA (PRA)
- test unakrsne reakcije (cross-mach)
OPŠIRNIJI OPIS AKTIVNOSTI:
Za serološku metodu potrebna je jedna vakutainer epruveta 9 ml sa antikoagulansom heparinom.
(Tipizacija klase I i tipizacija antigena HLA-B27)
Za molekularne metode potrebna je jedna vakutainer epruveta 5 ml sa antikoagulansom EDTA.
(Tipizacija klase I i klase II)
(Za test panel reaktivnih antitijela potrebna je jedna vakutainer epruveta 5 ml bez antikoagulansa.)
HLA sistem
Humani Leukocitni Antigeni naziv je za glavni kompleks tkivne podudarnosti (GKTP) kod čovjeka. Sadrži veliki broj gena koji su u vezi sa imunim sistemom. Nalaze se na kratkom kraku hromosoma 6, na odsječku 6p21.3 i kodiraju sintezu proteina koji predočavaju antigene imunološki kompetentnim stanicama.
Antigeni HLA klase I
Kodirani su genima koji se nalaze na kratkom kraku kromosoma 6. Po građi su glikoproteini. Nalaze se na svim stanicama s jezgrom i trombocitima. Klasični antigeni HLA klase I podijeljeni su u tri lokusa: HLA-A, HLA-B i HLA-C.
Antigeni HLA klase II
Kodirani su genima koji su smješteni centromerično (odsječak 6p21.3) na kratkom kraku hromosoma 6. Antigeni HLA klase II organizirani su u više podregija: HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP.
HLA tipizacija predstavlja niz postupaka i metoda u serološko-molekularnoj dijagnostici. Imaju zajednički i krajnji cilj determinirati pojedine HLA gene klase I ili klase II na razini alelne grupe ili alela. Svrha ovih metoda je utvrđivanje stepena tkivne kompatibilnosti između potencijalnih donora i recipijenta.
Tipizacija HLA genotipa može se podijeliti na:
1. Tipizaciju gena na razini alelne grupe ili HLA tipizaciju na nižem nivou genske rezolucije (engl. low resolution), što je dovoljno za alogene transplantacije solidnih organa.
2. Tipizaciju gena na razini alela ili HLA tipizaciju na višem nivou genske rezolucije (engl. high resolution) je značajna za alogenu transpantaciju koštane srži.
U kliničkoj praksi, podaci o HLA genotipizaciji prije svega koriste se u transplantacionoj imunologiji pri selekciji donora organa i koštane srži, te za identifikaciju predisponiranosti ili predisponirajućih gena za širok spektar oboljenja, naročito onih oboljenja sa infektivnom i autoimunom etiologijom.
Metode:
HLA tipizacija klase I (A, B i C) vrši se primjenom mikrolimfocitotoksičnog testa (MLCT)
2. HLA tipizacija klase I (A, B i C) niska rezolucija, primjenom lančane reakcije polimerazom i kvalitativnom detekcijom sekvenično specifičnih PCR produkata elektroforezom na agaroznom gelu (metodologija rada bazirana na PCR-SSP- Sequence Specific Primers)
HLA tipizacija klase I (A, B i C) niska rezolucija, primjenom asimetričnom PCR amplifikacijom sa različitim prajmerima po uzorku, te amplikoni obilježini biotinom se mješaju tokom PCR sa mix kuglicama, te se vežu sa komplemetarnim probama tokom hibridizacije (metodologija rada bazirana na PCR-SSO -Sequence Specific Oligos) Luminex tehnologija–fluoroanalizator na mikrosferama.
4. HLA tipizacija klase II (DRB1, DRB3,DRB4, DRB5 i DQB1) niska rezolucija, primjenom lančane reakcije polimerazom i kvalitativnom detekcijom sekvenično specifičnih PCR produkata elektroforezom na agaroznom gelu (metodologija rada bazirana na PCR-SSP- Sequence Specific Primers)
5. HLA tipizacija klase II (DRB1, DRB3,DRB4, DRB5 i DQB1) niska rezolucija, primjenom asimetričnom PCR amplifikacijom sa različitim prajmerima po uzorku, te amplikoni obilježini biotinom se mješaju tokom PCR sa mix kuglicama, te se vežu sa komplemetarnim probama tokom hibridizacije (metodologija rada bazirana na PCR-SSO -Sequence Specific Oligos) Luminex tehnologija–fluoroanalizator na mikrosferama.
HLA i bolesti
Danas je sa genima HLA povezano više od 100 bolesti (bolesti oka, sistemske bolesti s okularnom manifestacijom – reaktivni artritis, Reiter syndrome, RA, celijakija i psorijatični arthritis.
BOLEST | HLA ANTIGEN |
---|---|
REUMATOLOŠKE | |
Ankilozirajući spondilitis | B27 |
Reiterov sindrom | B27 |
Akutni prednji uveitis | B27 |
Reumatoidni artritis | DR1, DR4 |
Sistemski lupus eritematosus | B8, DR3, DR2 |
GASTROENTEROLOŠKE | |
Gluten-senzitivna enteropatija – celijakija | B8, DR3, DQ2, DQ3 |
Autoimuni hepatitis | DR3, DR4 |
Ulcerozni kolitis | B5, DR2 |
HEMATOLOŠKE | |
Idiopatska hemohromatoza | A3, B14 |
Hodgkinova bolest | A1, B5, B8, B18 |
Perniciozna anemija | DR5 |
ENDOKRINOLOŠKE | |
Diabetes mellitus, tip 1 | DR3, DR4, DQ2, DQ3 |
Gravesova bolest | A1, B8, DR3, DQ2 |
Hashimotov tiroiditis | DR5 |
NEUROLOŠKE | |
Myasthenia gravis | B8, DR3 |
Multipla skleroza | B7, DR2, DQ6 |
Narkolepsija | DR2, DQ6 |
Shizofrenija | A28 |
RENALNE | |
Goodpasterov sindrom | DR2 |
Policistična bubrežna bolest | B5 |
KOŽNE | |
Psorijaza | Cw6 |
Dermatitis herpetiformis | DQ2 |
Antitijela anti-HLA
Antitijela anti-HLA tipična su aloantitijela koja se stvaraju nakon kontakta imunoloških stanica sa stranim antigenom HLA. Uzrok senzibilizacije su transfuzije krvi, trudnoće i transplantacije tkiva i organa. Najčešće pripadaju imunoglobulinima IgG i aktiviraju komplement. Zbog toga se svi bolesnici koji čekaju transplantaciju svaka četiri mjeseca testiraju na prisustvo limfocitotoksičnih antitijela i određuje se % panel reaktivnih antitijela (PRA). Prisustvo antitijela dokazuje se testom mikrolimfocitotokcičnosti ovisnim o komplementu (MLCT) sa i bez dodatka ditiotreitol-a (DTT ), te Luminex tehnologijom flouroanalizator sa mikrosferama.
Unakrsna reakcija (engl. CROSS-MATCHING)
Testiranje primaoca na postojanje antitijela specifičnih za ćelije potencijalnog davaoca metodom mikrocitotoksičnog testa ( serum primaoca i limfociti davaoca)
pozitivan test- kontraindikovana transplatacija